【摘要】樹立了蔬菜中乙草胺、甲草胺、苯氧菊酯、多效唑、環(huán)氟菌胺、氟蟲腈、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威殘留量氣相色譜同時(shí)剖析辦法。采用分散固相萃取技術(shù)，在提取液中參加c18、石墨炭黑、psa等吸附劑粉末停止凈化，依據(jù)檢測(cè)器選擇溶劑置換，采用db1701毛細(xì)管柱別離，μecd檢測(cè)。13種農(nóng)藥的濃度范圍在0.002～0.05mg/kg時(shí)，回收率在80%～100%之間、rsd為1%～6%。各農(nóng)藥的檢出限為：氟蟲腈、環(huán)氟菌胺0.002mg/kg；苯氧菊酯、甲草胺、乙草胺0.004mg/kg；多效唑、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威0.01mg/kg。該辦法步驟簡(jiǎn)單，凈化效果好，具有良好的靈敏度、回收率和重現(xiàn)性。
1、引言
農(nóng)藥殘留和食品安全問(wèn)題在國(guó)際社會(huì)遭到普遍關(guān)注，食品農(nóng)產(chǎn)品的農(nóng)藥殘留檢測(cè)項(xiàng)目日益增加、限量請(qǐng)求日益嚴(yán)厲。在剖析儀器高度開展的今天，樣品的處置技術(shù)在農(nóng)藥殘留剖析中占領(lǐng)越來(lái)越重要的位置。如今的前處置技術(shù)多采用自制填充柱、spe小柱或基質(zhì)固相分散技術(shù)[1,2]。采用填充柱凈化法和基質(zhì)固相分散技術(shù)費(fèi)時(shí)并耗費(fèi)大量的有機(jī)試劑；采用spe小柱凈化，經(jīng)常多種分離運(yùn)用，招致本錢較高。2003年美國(guó)農(nóng)業(yè)部提出了分散型固相萃取技術(shù)[3]，關(guān)于此凈化辦法，現(xiàn)有文獻(xiàn)[4～6]中大部分只采用psa凈化，psa吸附劑具有弱的陰離子交流才能，有利于吸附樣品基質(zhì)中的有機(jī)酸、糖以及色素，但關(guān)于基質(zhì)復(fù)雜的蔬菜凈化效果并不太理想。本辦法在實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上創(chuàng)新性的增加了c18、石墨炭黑等吸附劑粉末同時(shí)凈化，依據(jù)氣相色譜μecd檢測(cè)器停止溶劑轉(zhuǎn)溶，實(shí)現(xiàn)了對(duì)基質(zhì)復(fù)雜的蔬菜中乙草胺、甲草胺、苯氧菊酯、多效唑、環(huán)氟菌胺、氟蟲腈、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺及茚蟲威等多種農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)。
2、實(shí)驗(yàn)部分
2.1儀器和試劑
agilent6890n氣相色譜儀，配μecd檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣器；渦流混勻器（ika公司）；研磨機(jī)（德國(guó)gm公司）；離心機(jī)（中國(guó)安亭公司）；電子天平（梅特勒公司）；均質(zhì)器（ika公司）。乙草胺、甲草胺、苯氧菊酯、多效唑、環(huán)氟菌胺、氟蟲腈、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威等農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（dr.公司的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)）；正己烷、丙酮、乙腈均為色譜純；冰醋酸：優(yōu)級(jí)純；無(wú)水乙酸鈉：剖析純；無(wú)水硫酸鎂：剖析純（500℃馬弗爐內(nèi)烘5h，冷卻取出裝瓶備用）；psa粉；c18粉；氨基粉（nh2）；石墨碳黑粉；0.1%冰醋酸/乙腈溶液（移取1mｌ冰醋酸參加1000ml乙腈混勻）。
2.2實(shí)驗(yàn)辦法
2.2.1標(biāo)準(zhǔn)工作液的配制
稱取乙草胺、甲草胺、苯氧菊酯、多效唑、環(huán)氟菌胺、氟蟲腈、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威標(biāo)準(zhǔn)品各10.0mg,用丙酮溶解后，置于13個(gè)100ml棕色容量瓶中，并用丙酮定容至刻度，混勻，濃度分別為100mg/l，分別移取以上標(biāo)準(zhǔn)液氟蟲腈、環(huán)氟菌胺(a組)各1.0ml,甲草胺、乙草胺、苯氧菊酯（b組）各2.0ml,多效唑、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威（c組）各5.0ml置于100ml棕色容量瓶中，用正己烷稀釋至刻度，a組、ｂ組和ｃ組標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度分別為1．０、２．０和５．０mg/l。
2.2.2樣品制備及提取、凈化
稱取樣品適量，置于100ml塑料離心管中，參加0.1%醋酸/乙腈溶液10ml，正己烷5ml，無(wú)水硫酸鎂5.0g,無(wú)水乙酸鈉2.0g，用玻璃棒充分?jǐn)嚢杈鶆颍诰|(zhì)機(jī)上高速均質(zhì)2min，5000r/min高速離心8min，移取全部上清液于15ml塑料離心管中，氮?dú)獯蹈桑瑴?zhǔn)確參加0.1%醋酸/乙腈+正己烷溶液（1+1）2ml溶解殘?jiān)?1400r/min渦漩混合2min，溶解液轉(zhuǎn)移入盛有適量psa、c18粉、石墨碳黑粉的離心管中。以1400r/min渦漩混合2min離心。取上清液1ml，置于離心管中氮吹至近干，用正己烷溶解，定容至1ml，過(guò)0.22μm濾膜，供gc測(cè)定。若樣品為含硫醚類化合物蔬菜[7,8]如蔥、蒜苔等，依據(jù)樣品情況切塊或切段，采用格蘭仕微波爐中火加熱30s，樣品再打碎稱取適量停止提取及凈化。
2.2.3色譜條件
db1701毛細(xì)管柱(30m×0.32mm，0.25μm)；載氣：高純氮，純度＞99.999%；柱溫：60℃（1.25min）20℃/min180℃(7min)（10℃/min）230℃（7min）（10℃/min）270℃（15min）；柱流速：1.4ml/min，恒流；進(jìn)樣口溫度：250℃;檢測(cè)器：μecd；檢測(cè)器溫度：300℃；進(jìn)樣量：1μl。
3、結(jié)果與討論
3.1吸附劑粉末的優(yōu)化選擇
在相同混標(biāo)溶液中分別參加psa、石墨碳黑、c18、氨基粉等不同的吸附劑粉末處置，每組6個(gè)平行樣，所得的回收率數(shù)據(jù)見(jiàn)表1，石墨炭黑粉等去除色素等雜質(zhì)的效果好，但是對(duì)茚蟲威吸附較強(qiáng)、用量要適量，氨基粉與psa凈化效果相同，但氨基粉對(duì)多種農(nóng)藥的吸附性均較強(qiáng)，c18和psa對(duì)上述13種農(nóng)藥回收率影響較小。所以本實(shí)驗(yàn)選擇psa、石墨碳黑、c18為吸附劑加強(qiáng)凈化效果。表113種農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)品分別經(jīng)4種吸附劑處置后的回收率（略）
3.213種農(nóng)藥在不同基質(zhì)中的回收率
吸附劑粉末的用量也是影響前處置效果的重要因素，應(yīng)依據(jù)樣品情況和目標(biāo)物性質(zhì)通過(guò)實(shí)驗(yàn)選擇合適的吸附劑用量。關(guān)于蔬菜樣品吸附劑粉末用量范圍一般為：psa粉100～200mg、c18粉100～200mg、石墨碳黑50mg。辦法中樣品為菠菜、黃桃、胡蘿卜，樣品色素重，如果僅采用psa，色素及干擾物去除效果不理想，凈化液顏色較深、干擾峰多、基線高，結(jié)果難判斷及定量（圖1a）。所以實(shí)驗(yàn)采用150mgpsa、150mgc18、石墨碳黑粉50mg，凈化效果較好，凈化液呈淺色或無(wú)色，目標(biāo)峰附近無(wú)大干擾峰（圖1b），添加回收率見(jiàn)表2（濃度為0.01mg/kg）。表213種農(nóng)藥（濃度均為0.01mg/kg）在胡蘿卜、黃桃、菠菜樣品中的回收率。
3.313種農(nóng)藥的保留時(shí)間、線性范圍、相關(guān)系數(shù)及檢出限
取系列濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，依次進(jìn)樣，以色譜峰面積對(duì)濃度作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得13種農(nóng)藥的線性方程及相關(guān)系數(shù)，在0.05～10mg/l之間線性關(guān)系良好。表313種農(nóng)藥保留時(shí)間、線性范圍、相關(guān)系數(shù)和檢出限。
3.4辦法回收率、精密度
在已知不含農(nóng)藥殘留的菠菜樣品中分別參加不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液(a、b、c３組的混標(biāo)溶液)，按本辦法停止提取、凈化和檢測(cè)，以峰面積計(jì)算各種農(nóng)藥在0.002～0.05mg/kg添加水平的回收率（同一水平樣品組n=6），計(jì)算各農(nóng)藥的平均回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(見(jiàn)表4)，標(biāo)準(zhǔn)品譜圖見(jiàn)圖2（0.1mg/l）、添加回收譜圖見(jiàn)圖4（0.01mg/kg）,氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯在本實(shí)驗(yàn)中所采用的db1701的色譜柱上不能完全別離，但在db5色譜柱上可完全別離。辦法檢出限為：氟蟲腈、環(huán)氟菌胺均為0.002mg/kg;苯氧菊酯、甲草胺、乙草胺均為0.004mg/kg；多效唑、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威均為0.01mg/kg，完全滿足蔬菜中農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)請(qǐng)求。表413種農(nóng)藥的回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
3.5小結(jié)
本辦法用分散型固相萃取氣相色譜法對(duì)蔬菜中的乙草胺、甲草胺、苯氧菊酯等13種殘留停止檢測(cè)。依據(jù)蔬菜樣品情況及目標(biāo)物性質(zhì)選擇多種吸附劑粉搭配運(yùn)用，并對(duì)其用量停止實(shí)驗(yàn)確定。此凈化辦法減少了雜質(zhì)干擾，色譜峰別離度好，具有良好的精密度及較低的辦法檢測(cè)低限。通過(guò)對(duì)100批樣品的檢測(cè)和協(xié)作實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證了本辦法的實(shí)用性。
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